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Gas6双切口酶质粒(h) | sc-400978-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Gas6双切口酶质粒(h2) | sc-400978-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
生长停滞特异性6(GAS6)基因编码Gas6蛋白;Gas6是一种维生素K依赖性的分泌型配体,可与TAM受体酪氨酸激酶家族成员AXL、MERTK和TYRO3结合。Gas6–TAM信号通过包括PI3K–AKT、MAPK/ERK和NF-κB在内的通路,调控凋亡细胞清除(efferocytosis)、先天免疫稳态、血小板功能以及细胞生存程序,并在不同情境下对细胞增殖与迁移产生差异性影响。在多种组织中,GAS6/AXL轴活性异常与炎症性重塑、纤维化以及肿瘤相关信号传导有关,因此GAS6常被作为研究微环境相互串扰的靶点。作为分泌因子,Gas6也为在共培养与条件培养基模型中解析受体-配体动态关系及旁分泌调控提供了一个易于操作的关键节点。
Gas6 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 GAS6 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对GAS6内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏GAS6的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了GAS6基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。