Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Plasmide Double Nickase (h) Gas6: sc-400978-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Gas6 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Gas6 Double Nickase (h) et le plasmide Gas6 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant GAS6. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Gas6 Antibody (A-9): sc-376087
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Gas6 | sc-400978-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Gas6 | sc-400978-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène *Growth arrest–specific 6* (GAS6) code la protéine Gas6, un ligand sécrété dépendant de la vitamine K pour les récepteurs tyrosine kinases de la famille TAM : AXL, MERTK et TYRO3. La signalisation Gas6–TAM régule l’efferocytose, l’homéostasie de l’immunité innée, la fonction plaquettaire et les programmes de survie cellulaire via des voies incluant PI3K–AKT, MAPK/ERK et NF-κB, avec des effets sur la prolifération et la migration dépendants du contexte. Dans de nombreux tissus, une activité altérée de l’axe GAS6/AXL a été associée au remodelage inflammatoire, à la fibrose et à des signalisations liées aux tumeurs, faisant de GAS6 une cible fréquente dans les études sur les interactions au sein du microenvironnement. En tant que facteur sécrété, Gas6 constitue aussi un nœud expérimental accessible pour disséquer la dynamique récepteur‑ligand et la régulation paracrine dans des modèles de co‑culture et de milieux conditionnés.
Gas6 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus GAS6 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de GAS6. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de GAS6. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de GAS6.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.