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G3BP2慢病毒激活颗粒(h) | sc-403630-LAC | 200 µl | $455.00 |
G3BP2(G3BP 应激颗粒组装因子 2)是一种 RNA 结合蛋白,作为应激颗粒成核和 mRNA 分流(triage)的核心支架,在细胞应激过程中协调转录本稳定性与翻译。它参与与干扰素信号、先天免疫反应以及对氧化应激和内质网应激适应相关的转录后调控网络,并进一步影响细胞周期进程和细胞存活通路。通过与信号转导及 RNA 代谢组分的相互作用,G3BP2 有助于将环境刺激与核糖核蛋白复合体重塑及翻译调控相耦联。涉及 G3BP2 的应激颗粒动力学与 RNA 稳态失衡已与多种疾病相关过程有关,包括肿瘤细胞的应激耐受、神经退行性疾病相关的蛋白/RNA 聚集,以及炎症信号传导。
G3BP2 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 G3BP2 表达。
G3BP2 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在G3BP2转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性G3BP2表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 G3BP2 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。