Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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FTα Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403920
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- FTα O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico FTα, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:FTα Anticorpo (D-5): sc-374262
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
FTα Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403920 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
FNTA codifica a subunidade alfa da farnesiltransferase de proteínas (FTα), que forma um heterodímero com a FNTB para catalisar a farnesilação de proteínas com o motivo CaaX na extremidade C-terminal. Essa modificação lipídica promove a associação à membrana, o tráfego subcelular e interações proteína–proteína de reguladores-chave de sinalização, incluindo as GTPases da família RAS e as laminas nucleares. Ao controlar a localização e a estabilidade de substratos prenilados, a FTα contribui para vias que regulam proliferação, dinâmica do citoesqueleto, transporte vesicular e respostas ao estresse. A prenilação desregulada e a sinalização anômala de RAS/laminas têm sido associadas à sinalização oncogênica, a fenótipos de envelhecimento precoce e a outras doenças nas quais a sinalização dependente de membrana e a arquitetura nuclear estão alteradas.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO FTα (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene FNTA em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do FNTA, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do FNTA na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína FTα.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de FNTA para a investigação da sinalização de FTα, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) FNTA críticos para a função FTα
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos FNTA para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo FTα Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo FTα Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus FNTA. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo FTα Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR FTα (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia FNTA para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo FNTA definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.