Plasmide Double Nickase (h) FOXC2: sc-402351-NIC

FOXC2 code un facteur de transcription à domaine forkhead box qui régule la spécification des lignages, les programmes de transition épithélio-mésenchymateuse et le développement vasculaire et lymphatique, via un contrôle de l’expression génique dépendant du contexte. Il intègre des signaux issus de voies telles que TGF-β, WNT/β-caténine et NOTCH afin de moduler la migration cellulaire, le remodelage de la matrice extracellulaire et les réponses angiogéniques/lymphangiogéniques. Une activité dérégulée de FOXC2 a été associée à des altérations de l’organisation du réseau lymphatique et à des phénotypes développementaux, et une expression élevée est fréquemment liée à des états cellulaires invasifs dans des modèles de cancer. En tant que régulateur nucléaire se liant à l’ADN, FOXC2 est largement étudié pour ses rôles dans les réseaux transcriptionnels qui gouvernent la plasticité associée aux métastases et l’homéostasie tissulaire.

FOXC2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus FOXC2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de FOXC2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de FOXC2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de FOXC2.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.