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Filamin 1慢病毒激活颗粒(h) | sc-400557-LAC | 200 µl | $455.00 |
人类 FLNA 基因编码丝状蛋白 1(filamin 1),这是一种可与肌动蛋白结合的支架蛋白,能够交联 F-肌动蛋白(F-actin)网络,并将细胞骨架与膜受体耦联,从而塑造细胞结构、黏附能力以及机械信号转导。丝状蛋白 1 通过整合素(integrins)和黏着斑复合体(focal adhesion complexes)协调信号传递,并调控支配细胞迁移、内吞作用与细胞骨架重塑的通路,其中包括依赖 Rho 家族 GTPase 的动态调节。通过这些相互作用,FLNA 影响组织发育与血管完整性;在神经元迁移障碍、结缔组织相关表型以及癌细胞侵袭等研究背景中也备受关注,因为这些情境往往伴随肌动蛋白重塑与受体信号的改变。
Filamin 1 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 FLNA 表达。
Filamin 1 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在FLNA转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性Filamin 1表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 FLNA 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。