Plasmide Double Nickase (h) FGF-1: sc-416438-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) FGF-1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide FGF-1 Double Nickase (h) et le plasmide FGF-1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant FGF1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: FGF-1 Antibody (B-3): sc-55520
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) FGF-1 | sc-416438-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) FGF-1 | sc-416438-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FGF1 code le facteur de croissance des fibroblastes 1 (FGF‑1), un mitogène pléiotrope qui régule la prolifération, la survie, la migration et la différenciation dans de nombreux types cellulaires, notamment les cellules endothéliales, les fibroblastes et des lignées neurales. FGF‑1 transmet ses signaux principalement via les tyrosine kinases FGFR, en activant les voies MAPK/ERK, PI3K–AKT et PLCγ, et coordonne ainsi les réponses angiogéniques, le remodelage de la matrice extracellulaire et les programmes associés à la réparation tissulaire. Une dérégulation de la signalisation FGF1–FGFR a été impliquée dans un remodelage vasculaire aberrant et des phénotypes induits par des facteurs de croissance, pertinents en oncologie ainsi que dans les troubles métaboliques et inflammatoires. L’activité de FGF‑1 est également liée à la réponse au stress et à l’homéostasie tissulaire, faisant de FGF1 un nœud utile pour disséquer les interactions entre voies de signalisation et le contrôle de la croissance dépendant du contexte.
FGF-1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus FGF1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de FGF1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de FGF1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de FGF1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.