Particules Lentivirales d'Activation (h) Fatty Acid Synthase: sc-400440-LAC

Le gène humain **FASN** code la **fatty acid synthase** (synthase des acides gras), un complexe enzymatique cytosolique multifonctionnel qui catalyse la **lipogenèse de novo** en convertissant l’acétyl-CoA et le malonyl-CoA en acides gras saturés à longue chaîne, tels que le palmitate. Cette activité s’intègre au métabolisme central du carbone, à la biosynthèse réductrice dépendante du NADPH et au remodelage lipidique, afin de soutenir la biogenèse des membranes, l’acylation des protéines et la signalisation dérivée des lipides. La fonction de FASN croise des voies de détection des nutriments et de croissance, notamment la signalisation **PI3K–AKT–mTOR**, et est modulée par des programmes transcriptionnels pilotés par **SREBP** et d’autres régulateurs lipogéniques apparentés. Une expression dérégulée de FASN et un flux lipogénique accru sont fréquemment associés aux maladies métaboliques et à la reprogrammation métabolique liée au cancer, faisant de FASN un nœud clé pour l’étude du métabolisme lipidique et des transitions d’état cellulaire.

Les particules d'activation lentivirales Fatty Acid Synthase (h) répondent à ce besoin en encapsulant le système complet d'activation transcriptionnelle SAM (Synergistic Activation Mediator) dans des particules lentivirales à titre élevé prêtes à la transduction, permettant une régulation à la hausse efficace de FASN dans un plus large éventail de types de cellules humaines.

Les particules d'activation lentivirales Fatty Acid Synthase (h) délivrent tous les composants fonctionnels du système médiateur d'activation synergique (SAM) via la transduction lentivirale. Le système comprend trois préparations de particules co-transduites dans les cellules cibles : l'une codant pour une dCas9 catalytiquement inactive (mutations D10A et N863A) fusionnée au domaine de transactivation VP64 avec un gène de résistance à la blasticidine ; une codant pour la protéine de fusion MS2-p65-HSF1 avec un gène de résistance à l'hygromycine ; et une codant pour un ARNsg de 20 nt spécifique de la cible, fusionné à deux aptamères d'ARN MS2 avec un gène de résistance à la puromycine. Après transduction lentivirale et intégration génomique des cassettes d'expression, les composants du SAM sont exprimés de manière stable et s'assemblent au locus cible dans la région promotrice proximale en amont du site de départ de la transcription FASN, où VP64, p65 et HSF1 agissent de manière coopérative pour recruter l'appareil transcriptionnel endogène et induire une régulation à la hausse soutenue de l'expression endogène de Fatty Acid Synthase. L'utilisation de dCas9 inactif sur les nucléases évite l'introduction de cassures double brin de l'ADN et préserve le locus génomique natif FASN ainsi que l'architecture régulatrice.

Le format lentiviral offre plusieurs avantages pratiques : l'intégration génomique stable permet une activation héréditaire au fil des divisions cellulaires ; les préparations de particules à titre élevé éliminent le besoin d'une production virale en interne ; et la compatibilité avec les types de cellules primaires, non divisibles et résistantes à la transfection élargit l'accessibilité expérimentale. Le succès de la transduction peut être confirmé et renforcé par une triple sélection antibiotique utilisant la puromycine, l'hygromycine et la blasticidine.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.