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Fatty Acid Synthase慢病毒激活颗粒(h) | sc-400440-LAC | 200 µl | $455.00 |
人类 FASN 基因编码脂肪酸合酶(fatty acid synthase, FASN),这是一种多功能的细胞质酶复合体,可通过将乙酰辅酶A(acetyl‑CoA)和丙二酰辅酶A(malonyl‑CoA)转化为棕榈酸等长链饱和脂肪酸来催化从头脂质生成(de novo lipogenesis)。该活性与中心碳代谢、依赖 NADPH 的还原性生物合成以及脂质重塑过程相互耦联,从而支持细胞膜生物发生、蛋白质酰化以及脂质来源的信号传导。FASN 的功能还与包括 PI3K–AKT–mTOR 在内的营养感知与生长通路交叉,并受 SREBP 及相关促脂生成调控因子驱动的转录程序调节。FASN 表达及脂质生成通量的失调常与代谢性疾病状态和癌症相关的代谢重编程有关,因此它是研究脂质代谢与细胞状态转变的关键节点。
Fatty Acid Synthase 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 FASN 表达。
Fatty Acid Synthase 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在FASN转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性Fatty Acid Synthase表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 FASN 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。