FAT2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402931-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- FAT2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase FAT2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase FAT2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para FAT2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:FAT2 Anticorpo (8C5): sc-59985
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
FAT2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402931-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
FAT2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402931-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FAT2 codifica uma proteína transmembrana atípica do tipo caderina, da família das protocaderinas FAT, que contribui para a adesão célula–célula e para a organização da arquitetura epitelial. Por meio de suas extensas repetições extracelulares de caderina e de sua capacidade de sinalização intracelular, o FAT2 está ligado à regulação da dinâmica do citoesqueleto e a processos associados à polaridade planar, que influenciam a forma celular, a migração e a morfogênese tecidual. Alterações na função da família FAT têm sido associadas a estados de polaridade e adesão desorganizados, que podem afetar programas de diferenciação e o equilíbrio entre proliferação e inibição por contato. O FAT2 tem sido estudado no contexto da biologia do câncer e da regulação do desenvolvimento, em que mudanças na sinalização de adesão e em redes de polaridade são relevantes para os mecanismos de doença.
FAT2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus FAT2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de FAT2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função FAT2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com FAT2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.