FADS6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-435879

概要

脂肪酸デサチュラーゼ6（FADS6）は膜関連酵素であり、多価不飽和脂肪酸に二重結合を導入する過程に関与して、脂質組成や下流の脂質シグナル伝達に影響を与える。生理活性をもつ脂肪酸およびその誘導体のプールを形成することで、FADS6はマウスの細胞や組織における膜流動性、オルガネラ機能、代謝恒常性に影響し得る。Fads6に関連する活性は、エネルギーバランスや炎症性メディエーターの供給を調整する、より広範な脂肪酸の不飽和化・伸長ネットワークとも交差している。デサチュラーゼ関連の脂質経路の破綻は、前臨床モデルにおいて、代謝ストレス、肝臓での脂質蓄積、神経発達における脂質要求、ならびに炎症表現型といった文脈でしばしば研究されている。

FADS6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるFads6遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Fads6内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Fads6のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、FADS6タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、FADS6シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Fads6欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• FADS6の機能に不可欠なFads6エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Fads6ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• FADS6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびFADS6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Fads6遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  FADS6 HDRプラスミド（m）および FADS6 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはFads6ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のFads6標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。