Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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Factor IX Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402469
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Factor IX O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Factor IX, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Factor IX Anticorpo (B-3): sc-377187
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Factor IX Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-402469 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O F9 humano codifica o fator IX da coagulação, um zimogénio de serina protease dependente de vitamina K que é ativado a fator IXa e atua na via intrínseca da coagulação sanguínea. Em complexo com o fator VIIIa em superfícies fosfolipídicas, o fator IXa catalisa a ativação do fator X, promovendo a geração de trombina e a formação do coágulo de fibrina. A atividade do F9 é modulada pela γ-carboxilação pós-traducional e pela ligação à membrana dependente de cálcio, associando-o ao processamento proteico hepático e a cascatas proteolíticas extracelulares. A disrupção ou deficiência funcional do F9 está associada a fenótipos hemorrágicos hereditários e é rotineiramente estudada para compreender a regulação da rede de coagulação e as interações entre proteases e cofatores.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Factor IX (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene F9 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do F9, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do F9 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Factor IX.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de F9 para a investigação da sinalização de Factor IX, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) F9 críticos para a função Factor IX
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos F9 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Factor IX Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Factor IX Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus F9. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Factor IX Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Factor IX (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia F9 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo F9 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.