Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
ETO Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401755-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ETOO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ETO (h) e o Plasmídeo Double Nickase ETO (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para RUNX1T1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ETO Anticorpo (3H11): sc-134335
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ETO Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401755-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ETO Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401755-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RUNX1T1 (ETO) codifica um correpressor transcricional nuclear que atua em parceria com fatores de transcrição com ligação ao DNA para modular programas de expressão gênica que controlam a diferenciação hematopoética e o comprometimento de linhagem. ETO contém regiões de homologia Nervy que recrutam complexos NCoR/SMRT–HDAC e outros reguladores de cromatina, conectando RUNX1T1 ao silenciamento epigenético, à repressão transcricional e ao remodelamento da atividade de potenciadores (enhancers). A desregulação da função de RUNX1T1 está fortemente implicada na leucemogênese, mais notadamente por meio de fusões RUNX1–RUNX1T1 que perturbam redes transcricionais dependentes de RUNX1 e bloqueiam a maturação mieloide. Essas vias tornam RUNX1T1 um alvo útil para estudar mecanismos de repressão transcricional, dinâmica do estado da cromatina e programas de diferenciação alterados em modelos celulares relevantes para o câncer.
ETO O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus RUNX1T1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de RUNX1T1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função RUNX1T1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com RUNX1T1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.