Plasmide Double Nickase (h) ERAP2: sc-412989-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) ERAP2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ERAP2 Double Nickase (h) et le plasmide ERAP2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ERAP2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) ERAP2 | sc-412989-NIC | 20 µg | $410.00 |
ERAP2 (aminopeptidase 2 du réticulum endoplasmique) est une métallopeptidase au zinc résidente du RE qui raccourcit les résidus N-terminaux des précurseurs de peptides antigéniques afin d’optimiser leur chargement sur les molécules du CMH de classe I. En façonnant l’immunopeptidome, ERAP2 contribue au traitement et à la présentation des antigènes, influençant la reconnaissance par les lymphocytes T CD8+ et la surveillance immunitaire. Son activité s’articule avec l’approvisionnement en peptides dépendant du protéasome et de TAP, ainsi qu’avec les processus de contrôle qualité du RE qui régissent l’édition des peptides avant leur exposition à la surface cellulaire. Des variations génétiques et une expression altérée d’ERAP2 ont été associées à des phénotypes immuno‑médiés et inflammatoires, ce qui étaye son utilisation dans des études sur les interactions hôte–pathogène et les mécanismes de maladie liés aux HLA.
ERAP2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ERAP2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ERAP2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ERAP2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ERAP2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.