EphA7 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-420197-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- EphA7O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase EphA7 (m) e o Plasmídeo Double Nickase EphA7 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Epha7. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:EphA7 Anticorpo (E-7): sc-393973
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
EphA7 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-420197-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
EphA7 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-420197-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Epha7 codifica o EphA7, uma tirosina-quinase receptora da família ephrin–Eph que medeia sinalização dependente de contato para regular o posicionamento celular, a formação de fronteiras e a orientação axonal durante o desenvolvimento. Após a ligação do ligante ephrin, o EphA7 ativa vias que envolvem GTPases da família Rho, sinalização por MAPK e remodelamento do citoesqueleto, moldando programas de migração e adesão. No sistema nervoso, o EphA7 contribui para a montagem de circuitos neurais e a organização sináptica, e alterações na sinalização Eph/ephrin têm sido associadas a defeitos no padrão neurodesenvolvimental e à desregulação da arquitetura tecidual. Como os receptores Eph também influenciam decisões de proliferação e diferenciação, Epha7 é frequentemente estudado em contextos em que a comunicação célula–célula e a organização espacial afetam fenótipos relevantes para doenças.
EphA7 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Epha7 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Epha7. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Epha7. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Epha7 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.