Emx2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420170

Visão geral

EMX2 (empty spiracles homeobox 2) é um fator de transcrição com homeodomínio que controla a padronização regional e as decisões de destino celular durante a embriogênese, com papéis de destaque na regionalização do prosencéfalo e do córtex, bem como no desenvolvimento urogenital e dos membros em camundongos. Ele regula programas de expressão gênica do desenvolvimento ao se ligar a elementos cis-regulatórios e coordenar redes que interagem com a sinalização de morfógenos WNT/β-catenina, FGF e BMP, influenciando a proliferação e a diferenciação de progenitores e a formação de limites teciduais. Alterações na dosagem de Emx2 ou em sua atividade regulatória têm sido associadas a anormalidades do neurodesenvolvimento e malformações estruturais, e a expressão desregulada de EMX2 foi relatada em múltiplos contextos tumorais como marcador de estados de diferenciação aberrantes. Essas características tornam o Emx2 um nó útil para estudar o controle transcricional de vias do desenvolvimento e a especificação de linhagens.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Emx2 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Emx2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Emx2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Emx2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Emx2.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Emx2 para a investigação da sinalização de Emx2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Emx2 críticos para a função Emx2
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Emx2 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Emx2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Emx2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Emx2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Emx2 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Emx2 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Emx2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Emx2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.