ELL3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405835

Visão geral

ELL3 (gene 3 da leucemia rico em lisina eleven-nineteen) codifica uma proteína semelhante a um fator de elongação transcricional relacionada à família ELL, que interage com a RNA polimerase II para influenciar a elongação produtiva e a produção de transcritos. Embora seja menos bem caracterizado do que outros parálogos de ELL, o ELL3 está implicado na regulação de programas de expressão gênica ligados à identidade celular, diferenciação e temporização do desenvolvimento, por meio da modulação da dinâmica da transcrição. O controle alterado da elongação e do processamento de RNA é uma característica recorrente de desregulações oncogênicas e do desenvolvimento, tornando o ELL3 um alvo relevante para estudar como a maquinaria transcricional contribui para a expressão gênica aberrante. Em células humanas, investigar a função do ELL3 pode esclarecer o controle transcricional específico do contexto e suas potenciais conexões com assinaturas de expressão associadas a doenças.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO ELL3 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene ELL3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do ELL3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do ELL3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína ELL3.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de ELL3 para a investigação da sinalização de ELL3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) ELL3 críticos para a função ELL3
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos ELL3 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo ELL3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo ELL3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus ELL3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo ELL3 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR ELL3 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia ELL3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo ELL3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.