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ECM2慢病毒激活颗粒(m) | sc-436571-LAC | 200 µl | $455.00 | |||
ECM2慢病毒激活颗粒(m2) | sc-436571-LAC-2 | 200 µl | $455.00 |
小鼠 Ecm2 基因编码细胞外基质蛋白 2(ECM2)。ECM2 是一种分泌型、与基质相关的糖蛋白,参与细胞外基质的组织构建并调控细胞—基质相互作用。ECM2 与细胞黏附、迁移和组织重塑等过程相关,并可影响依赖细胞外线索的信号通路,包括整合素介导的网络以及对生长因子反应的网络。细胞外基质组成的改变及其重塑动力学异常与纤维化、炎症微环境和肿瘤—间质相互作用有关,因此 Ecm2 适用于研究间质生物学及受基质调控表型的机制。在小鼠模型系统中,ECM2 为解析基质成分如何在发育与疾病情境下塑造细胞行为提供了一个便于操作的切入点。
ECM2 慢病毒激活颗粒(m)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 Ecm2 表达。
ECM2 慢病毒激活颗粒(m)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在Ecm2转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性ECM2表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 Ecm2 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。