Plasmide Double Nickase (h) DPF2: sc-404801-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) DPF2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide DPF2 Double Nickase (h) et le plasmide DPF2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant DPF2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: DPF2 Antibody (C-9): sc-514297
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) DPF2 | sc-404801-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) DPF2 | sc-404801-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DPF2 (double PHD fingers 2 ; également connu sous le nom de BAF45d) est un adaptateur associé à la chromatine qui reconnaît des marques d’histones via ses doigts de zinc PHD et aide à cibler les complexes de remodelage de la chromatine SWI/SNF (BAF) vers des loci génomiques spécifiques. En couplant les signaux épigénétiques au repositionnement des nucléosomes, DPF2 contribue à des programmes de régulation transcriptionnelle qui façonnent le contrôle du cycle cellulaire, la différenciation et l’expression génique en réponse aux stimuli. Le remodelage de la chromatine dépendant de DPF2 s’inscrit à l’intersection de voies gouvernant les réseaux de gènes du développement et les réponses transcriptionnelles associées aux dommages de l’ADN. La dérégulation des composants de SWI/SNF et des fonctions de lecteurs de la chromatine, y compris les activités associées à DPF2, est fréquemment étudiée dans le contexte d’états transcriptionnels altérés observés dans le cancer et d’autres troubles impliquant des perturbations épigénétiques.
DPF2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus DPF2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de DPF2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de DPF2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de DPF2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.