Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Dok-3 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-424217-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Dok-3O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Dok-3 (m) e o Plasmídeo Double Nickase Dok-3 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Dok3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Dok-3 Anticorpo (F-7): sc-390007
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Dok-3 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-424217-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Dok-3 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-424217-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene **Dok3** do camundongo codifica a proteína **Dok-3**, uma proteína adaptadora da família **DOK (downstream of kinase)** que modula a sinalização proximal aos receptores em células hematopoéticas e imunológicas. A Dok-3 participa das vias do receptor de célula B (BCR) e de receptores Fc ao montar complexos de sinalização que influenciam quinases da família Src, cascatas dependentes de Syk e saídas de MAPK/ERK, moldando assim os limiares de ativação e as respostas de citocinas. Por sua função de scaffolding (andaime), a Dok-3 contribui para a regulação da sinalização imune inata e adaptativa, incluindo respostas ligadas a receptores do tipo Toll (TLR) em linhagens mieloides. A desregulação da sinalização associada ao DOK3 tem sido implicada em disfunção imune e fenótipos inflamatórios, sustentando seu uso como alvo em estudos mecanísticos em imunologia e biologia de células hematopoéticas.
Dok-3 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Dok3 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Dok3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Dok3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Dok3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.