Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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DNA Ligase I Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402830-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- DNA Ligase IO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase DNA Ligase I (h) e o Plasmídeo Double Nickase DNA Ligase I (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para LIG1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:DNA Ligase I Anticorpo (C-5): sc-271678
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
DNA Ligase I Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402830-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DNA Ligase I Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402830-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene humano **LIG1** codifica a DNA ligase I, uma ligase dependente de ATP que sela quebras de fita simples ao unir fragmentos de Okazaki durante a síntese da fita retardada e ao completar a ligação de “nicks” no DNA associada a reparo. A DNA ligase I atua na interface entre a replicação e múltiplas vias de reparo do DNA, incluindo o reparo por excisão de bases de “long patch” e a resolução de descontinuidades nas fitas de DNA que surgem durante o processamento de danos ao DNA. A atividade adequada de LIG1 sustenta a estabilidade do genoma, a progressão da forquilha de replicação e a fidelidade do ciclo celular, e sua disfunção está associada ao aumento do estresse replicativo e da mutagênese. A capacidade de ligação alterada tem sido implicada em fenótipos de instabilidade genômica relevantes para a biologia do câncer e para síndromes hereditárias de deficiência de reparo do DNA, tornando o LIG1 um ponto útil para estudar mecanismos de manutenção do DNA.
DNA Ligase I O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus LIG1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de LIG1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função LIG1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com LIG1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.