Dexras2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (r): sc-437366

Visão geral

Dexras2 (RASD2) é uma pequena proteína de ligação a GTP relacionada à Ras, enriquecida em tecidos neurais, que funciona como um interruptor de sinalização a jusante de receptores acoplados à proteína G e de vias da sintase de óxido nítrico neuronal. Ela ajuda a acoplar a estimulação de receptores a mudanças na sinalização por nucleotídeos cíclicos, a respostas dependentes de cálcio e à plasticidade sináptica, por meio da modulação da adenilil ciclase e de cascatas de quinases a jusante. Em sistemas de rato, a Dexras2 tem sido utilizada para investigar mecanismos que controlam a sinalização neuronal ligada ao ritmo circadiano e à dopamina, com relevância para fenótipos neurocomportamentais e circuitos responsivos ao estresse. A desregulação de nós de sinalização da família RAS, como a Dexras2, é amplamente informativa para o estudo de transdução de sinal aberrante, excitabilidade neuronal e intercomunicação entre vias implicadas em disfunções do SNC.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Dexras2 (r) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene em linhas celulares rat. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do , juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Dexras2.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de para a investigação da sinalização de Dexras2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) críticos para a função Dexras2
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Dexras2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (r) e pelo Dexras2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (r2) têm como alvo locais distintos dentro do locus . Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Dexras2 Plasmídeo HDR (r) e o Plasmídeo HDR Dexras2 (r2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.