DDX36 Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h): sc-404744-LAC
- alvos específicos: human
- 200 µl de alto titulo de partículas de ativação lentiviral CRISPR/dCas9 prontas para a transdução of transduction-ready
- DDX36 as Partículas de Ativação Lentiviral (h) agem como um sistema de ativação de transcrição sinergética ao mediador de ativação (SAM, que foi criado para regular positivamente com especificidade e eficiência a expressão genética via transdução celular com lentivirus
- DDX36 As partículas de ativação lentivirais (h) contem os seguintes elementos de ativação SAM:uma nuclease Cas9 (dCas9) desativada (D10A and N863A) ligadas a um domínio de transactivacao VP64, uma proteína de fusão MS2-p65-HSF1 e um alvo-especifico de RNA guia de 20 nt guia RNA. Ainda, as partículas contem genes de resistência a blasticidina, higromicina e puromicina
- Durante a transdução, o complexo SAM se liga a uma região especifica de aproximadamente 200-250 nt upstream da região de inicia da transcrição e assegura um recrutamento robusto de fatores de transcrição para uma eficiente ativação genética
- Os gRNAs codificados pelo DDX36 Plasmídeo de Ativação Lentiviral (h) e pelo DDX36 Plasmídeo de Ativação Lentiviral (h2) têm como alvo regiões reguladoras distintas do promotor DHX36. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo: DDX36 Anticorpo (B-6): sc-377485
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
DDX36 Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h) | sc-404744-LAC | 200 µl | $455.00 |
DHX36 (também conhecido como DDX36) codifica uma helicase de RNA da família DEAH-box dependente de ATP que reconhece e resolve preferencialmente estruturas de G-quadruplexo em RNA e DNA, moldando assim o metabolismo de RNA e a manutenção do genoma. O DDX36 participa da regulação da tradução, do turnover de mRNA e da remodelagem de ribonucleoproteínas, e tem sido associado ao controle de programas transcricionais por mecanismos dependentes de G4. Ao modular o processamento, dependente de helicase, de ácidos nucleicos estruturados, o DDX36 influencia vias ligadas à progressão do ciclo celular, às respostas ao estresse e à sinalização imune inata. Atividade ou expressão desregulada de DDX36 tem sido associada na literatura a estados proliferativos e de diferenciação alterados e tem sido explorada em contextos relevantes para câncer e inflamação.
As Partículas de Ativação Lentivirais DDX36 (h) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de DHX36 numa gama mais ampla de tipos de células humanas.
As Partículas de Ativação Lentivirais DDX36 (h) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição DHX36, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de DDX36. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo DHX36 e a arquitetura reguladora.
O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.