DDX32 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-430371

개요

Dhx32는 마우스 DDX32 단백질을 암호화하며, ATP 의존적 RNA 헬리케이스로 추정되는 DEAD-box 계열 단백질입니다. 이 계열의 단백질은 ATP 구동 방식으로 RNA의 이차 구조와 리보핵단백질(RNP) 복합체를 재구성하는 데 관여하는 것으로 알려져 있습니다. 이러한 단백질들은 일반적으로 pre-mRNA 스플라이싱, RNA 수송, 리보솜 생합성, 번역 등 RNA 대사의 핵심 과정들을 조절하므로, DDX32의 활성은 유전자 발현 프로그램의 조절과 연결됩니다. RNA 헬리케이스 기능의 변화는 세포주기 조절, 분화, 스트레스 적응성 전사 반응을 교란할 수 있어, Dhx32는 발달 및 질환 관련 세포 표현형에서 RNA 처리 경로를 연구하는 데 유용한 좌위입니다. 마우스 시스템에서 Dhx32를 분석하면 RNA 대사와 신호전달 네트워크, 그리고 유전자형–표현형 관계를 연결하는 기전 연구를 뒷받침할 수 있습니다.

DDX32 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Dhx32 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Dhx32 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Dhx32의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 DDX32 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 DDX32 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Dhx32 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• DDX32 기능에 중요한 Dhx32 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Dhx32 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• DDX32 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 DDX32 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Dhx32 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  DDX32 HDR 플라스미드 (m) 및 DDX32 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Dhx32 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Dhx32 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.