DDR1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400517-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- DDR1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase DDR1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase DDR1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para DDR1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:DDR1 Anticorpo (C-6): sc-374618
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
DDR1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400517-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DDR1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400517-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DDR1 (receptor 1 do domínio discoidina) é uma tirosina-quinase receptora ativada por colágeno que funciona como um sensor da matriz extracelular, ligando o reconhecimento do colágeno à sinalização intracelular. Após a ativação, o DDR1 sofre autofosforilação e propaga vias envolvidas em adesão celular, remodelamento do citoesqueleto, migração e sobrevivência, com crosstalk documentado com as vias MAPK/ERK, PI3K–AKT e sinalização de adesões focais. A atividade do DDR1 contribui para a regulação das interações epiteliais e estromais, a organização da membrana basal e o remodelamento da matriz na homeostase normal dos tecidos. Alterações na expressão ou na sinalização do DDR1 têm sido associadas à fibrose e à invasão e metástase associadas a tumores, tornando-o um nó relevante para o estudo de fenótipos impulsionados pelo microambiente.
DDR1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus DDR1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de DDR1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função DDR1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com DDR1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.