Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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DDB2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401686-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- DDB2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase DDB2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase DDB2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para DDB2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:DDB2 Anticorpo (2246C4a): sc-81246
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
DDB2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401686-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DDB2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401686-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O DDB2 codifica um fator de reconhecimento de danos no DNA que se associa ao DDB1 para formar o complexo UV-DDB, um sensor-chave de fotolesões induzidas por UV que inicia o reparo por excisão de nucleotídeos (NER) do genoma global. Por meio do seu acoplamento à maquinaria da ligase E3 de ubiquitina CUL4A–RBX1, o DDB2 promove a verificação da lesão e o remodelamento da cromatina ao ubiquitinar substratos associados ao reparo, facilitando assim o recrutamento de componentes posteriores do NER. A atividade do DDB2 interage com o controle de checkpoints do ciclo celular e com vias de estabilidade genômica, conectando o reconhecimento defeituoso de danos a um aumento da carga mutacional. Alterações na expressão ou na função do DDB2 têm sido associadas a fenótipos de sensibilidade à radiação UV e têm sido estudadas no contexto da carcinogênese e de distúrbios relacionados ao reparo do DNA.
DDB2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus DDB2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de DDB2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função DDB2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com DDB2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.