Cytokeratin 6B Double Nickaseプラスミド (h): sc-401651-NIC
- 対象生物種: human
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- Cytokeratin 6B Double Nickaseプラスミド (h)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- Cytokeratin 6Bダブルニカースプラスミド（h）およびCytokeratin 6Bダブルニカースプラスミド（h2）は、KRT6Bを標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
Cytokeratin 6B Double Nickaseプラスミド (h) | sc-401651-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Cytokeratin 6B Double Nickaseプラスミド (h2) | sc-401651-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
KRT6Bはサイトケラチン6Bをコードしており、これはII型の中間径フィラメントタンパク質で、I型ケラチンとヘテロ二量体を形成して重層上皮の細胞骨格ネットワークを構築します。サイトケラチン6Bは機械的安定性、上皮分化、ストレス誘導性リモデリングに寄与し、デスモソームおよびヘミデスモソームの接着複合体と協調して組織の完全性を維持します。その発現は創傷修復プログラムやケラチノサイトの活性化状態と密接に結びついており、細胞骨格の組織化、細胞移動、バリア機能を制御する経路と交差します。サイトケラチン6Bの発現異常やケラチンネットワークの破綻は、上皮の過増殖や遺伝性皮膚疾患（genodermatoses）様の表現型と関連しており、皮膚生物学および角化研究におけるマーカー、ならびに機能的ハブとしての有用性を支持します。
Cytokeratin 6B ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における KRT6B 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、KRT6B内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、KRT6Bの機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、KRT6Bが破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。