Each CRISPR/Cas9 Knockout (KO) Plasmid product consists of a pool of 3 plasmids designed to ensure identification and cleavage of a specific gene for maximum knockout efficiency. Each plasmid encodes a unique 20 nt sequence derived from the GeCKO (v2) library.
Cytokeratin 6A CRISPR/Cas9 KO质粒 (m): sc-421354
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Cytokeratin 6A CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（m） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在Cytokeratin 6A基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Cytokeratin 6A CRISPR/Cas9 KO质粒 (m) | sc-421354 | 20 µg | $397.00 |
概述
Krt6a 编码细胞角蛋白 6A（cytokeratin 6A），这是一种 II 型中间丝蛋白，可与 I 型角蛋白形成异源二聚体，从而在复层上皮中构建角蛋白细胞骨架。它在创伤修复、机械应激和炎症信号刺激时会迅速被诱导表达，促进角质形成细胞的迁移与增殖，并增强屏障功能。细胞角蛋白 6A 参与细胞骨架重塑程序及细胞连接动态调控，影响上皮完整性与组织韧性。Krt6a 表达异常与表皮高增殖状态及角化缺陷相关，因此在小鼠模型中研究皮肤稳态与上皮应激反应时具有重要意义。
Cytokeratin 6A CRISPR/Cas9 KO质粒（m）是一组旨在针对性地破坏mouse细胞系中Krt6a基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对Krt6a基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏Krt6a开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使Cytokeratin 6A蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建Krt6a缺失的细胞模型，用于Cytokeratin 6A信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 Cytokeratin 6A 功能至关重要的 Krt6a 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 Krt6a 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 Cytokeratin 6A CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m) 和 Cytokeratin 6A CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m2) 编码的 gRNA 分别靶向 Krt6a 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 Cytokeratin 6A HDR 质粒（m）编码的 HDR 供体构建体以及 Cytokeratin 6A HDR质粒（m2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由Krt6a同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定Krt6a靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。