CYP2J2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402955-NIC

CYP2J2 codifica uma epoxigenase humana do citocromo P450 que oxida lipídios endógenos, incluindo a conversão do ácido araquidônico em ácidos epoxieicosatrienoicos (EETs), mediadores bioativos que influenciam o tônus vascular, a sinalização inflamatória e as respostas celulares ao estresse. Por meio da atividade monooxigenase microssomal, o CYP2J2 se integra às vias do metabolismo de eicosanoides e da homeostase redox, capazes de modular a função endotelial e a biologia do músculo liso. Alterações na expressão ou na atividade do CYP2J2 têm sido estudadas no contexto de características cardiometabólicas, estados inflamatórios e fenótipos de células tumorais, refletindo seu papel no equilíbrio de mediadores lipídicos e na sinalização celular. Como enzima metabolizadora de xenobióticos, o CYP2J2 também contribui para a biotransformação oxidativa de determinados compostos, o que o torna relevante para pesquisas em farmacologia e toxicologia.

CYP2J2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CYP2J2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CYP2J2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CYP2J2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CYP2J2 interrompido.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.