Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) cyclin D3: sc-400634-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) cyclin D3 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide cyclin D3 Double Nickase (h) et le plasmide cyclin D3 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CCND3. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: cyclin D3 Antibody (D-7): sc-6283
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) cyclin D3 | sc-400634-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) cyclin D3 | sc-400634-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CCND3 code la cycline D3, une cycline régulatrice qui s’associe à CDK4/6 pour phosphoryler les protéines de la famille RB et favoriser la progression du cycle cellulaire de G1 vers S. En intégrant les signaux mitogènes aux programmes transcriptionnels, la cycline D3 contribue au contrôle des points de contrôle, à la prolifération et à la différenciation spécifique de certaines lignées, en particulier dans les contextes hématopoïétiques. Une activité dérégulée de CCND3 est associée à une entrée aberrante dans le cycle cellulaire et à une instabilité génomique observées dans de multiples modèles liés aux cancers, ce qui en fait un nœud récurrent dans l’étude du contrôle de la croissance cellulaire et des voies de signalisation oncogéniques.
cyclin D3 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CCND3 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CCND3. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CCND3. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CCND3.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.