cyclin D1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400047-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- cyclin D1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase cyclin D1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase cyclin D1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CCND1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:cyclin D1 Anticorpo (A-12): sc-8396
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
cyclin D1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400047-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
cyclin D1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400047-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CCND1 codifica a ciclina D1, um regulador central da transição do ciclo celular G1/S que atua em parceria com CDK4/6 para fosforilar RB1 e promover a transcrição dependente de E2F. A ciclina D1 integra sinais mitogênicos de vias como RAS–MAPK e PI3K–AKT, conectando estímulos extracelulares à entrada no ciclo celular, à proliferação e à diferenciação. A expressão desregulada de CCND1 ou o ganho no número de cópias é frequentemente associado a controle anômalo de checkpoints, programas transcricionais alterados e instabilidade genômica em múltiplos contextos tumorais, tornando-o um alvo amplamente estudado em redes de sinalização do ciclo celular e oncogênicas.
cyclin D1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CCND1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CCND1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CCND1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CCND1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.