CSN8 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-430844

Visão geral

Cops8 codifica a CSN8, uma subunidade central do sinalossoma COP9 que regula as ligases E3 de ubiquitina do tipo cullin-RING ao controlar o estado de neddilação das cullinas e, assim, influenciar a renovação de proteínas dependente de ubiquitina. Por meio dessa atividade, a CSN8 contribui para a proteostase, a progressão do ciclo celular, as respostas a danos no DNA e a sinalização adaptativa ao estresse, modulando a estabilidade de proteínas regulatórias-chave. A disfunção do sinalossoma COP9 tem sido associada a alterações na sinalização inflamatória, prejuízo do desenvolvimento e da homeostase tecidual e desregulação da apoptose, tornando Cops8 relevante para estudos mecanísticos de vias que conectam a regulação por ubiquitina à aptidão celular. Em modelos murinos, a perturbação de componentes da CSN é frequentemente associada a defeitos no controle do crescimento e na função de órgãos, sustentando seu uso na investigação de fenótipos celulares relevantes para doenças, sem implicar resultados terapêuticos.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO CSN8 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Cops8 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Cops8, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Cops8 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína CSN8.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Cops8 para a investigação da sinalização de CSN8, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Cops8 críticos para a função CSN8
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Cops8 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo CSN8 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo CSN8 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Cops8. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo CSN8 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR CSN8 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Cops8 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Cops8 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.