Csk CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-419846

개요

Csk(C-terminal Src kinase)는 세포질에 존재하는 티로신 키나아제로, Src 계열 키나아제의 C-말단 조절 티로신을 인산화하여 자가억제(autoinhibited) 구조를 유지하게 함으로써 하위 신호전달을 억제합니다. Src 의존적 경로를 조절함으로써 Csk는 다양한 세포 유형에서 수용체 근접 신호전달, 초점부착(focal adhesion) 동역학, 세포골격 재구성, 그리고 면역 수용체 신호전달의 역치(threshold)에 영향을 미칩니다. 마우스 모델에서 Csk 활성의 변화는 림프구 활성화와 관용(tolerance)을 교란하고, 비정상적인 Src 키나아제 활성화를 통해 염증 및 종양성(oncogenic) 신호전달과 연관된 과정에도 영향을 줍니다. 따라서 Csk는 성장인자 및 면역 신호전달을 세포 부착, 이동, 증식 프로그램과 연결하는 핵심 음성 조절자로서 폭넓게 연구되고 있습니다.

Csk CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Csk 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Csk 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Csk의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Csk 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Csk 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Csk 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Csk 기능에 중요한 Csk 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Csk 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Csk CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 Csk CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Csk 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Csk HDR 플라스미드 (m) 및 Csk HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Csk 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Csk 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.