CSH1 CRISPR Activationプラスミド (h): sc-401213-ACT

CSH1は、成長ホルモン／プロラクチンファミリーに属する胎盤性糖タンパク質ホルモンである絨毛性ソマトマンモトロピンホルモン1をコードしており、妊娠中の母体の代謝適応を調節するとともに、胎児の成長を支えます。CSH1は主に合胞体栄養膜細胞で発現し、JAK/STATを含むサイトカイン受容体関連シグナル伝達およびそれに連動する転写プログラムを介して作用し、栄養分配、インスリン感受性、泌乳関連応答を協調的に制御します。文献では、胎盤におけるCSH1発現の変化が胎盤機能不全や不良な妊娠表現型と関連することが報告されており、栄養膜細胞の分化や内分泌胎盤生物学を評価する有用な分子指標とされています。研究の場では、CSH1は胎盤発生、ホルモン分泌、母体—胎児間コミュニケーションを制御する経路内のマーカーおよび機能的ハブとして、一般的に活用されています。

CSH1 CRISPR活性化プラスミド（h）は、基盤となるDNA配列を変更することなく、内因性CSH1の発現を標的化し、非破壊的にアップレギュレートするアプローチを提供します。

CSH1 CRISPR 活性化プラスミド (h) は、ヒト細胞株における CSH1 遺伝子座の高効率かつ部位特異的な転写アップレギュレーションのために設計された、3 つのプラスミドからなる相乗的活性化メディエーター (SAM) システムです。このシステムは、DNA結合能を維持しつつヌクレアーゼ活性を失わせる2つの不活性化変異（D10AおよびN863A）を有する、触媒活性のないCas9（dCas9）を中核としています。このdCas9は、強力な転写活性化因子であるVP64と融合しており、選別用のブラスティシジン耐性遺伝子と共に共発現します。2番目のプラスミドは、dCas9-VP64と協調して機能する二次活性化複合体であるMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードしており、ヒグロマイシン耐性遺伝子と共に発現する。3番目のプラスミドは、標的特異的な20塩基対のsgRNAをコードしており、これはMS2-p65-HSF1複合体を活性化部位に誘導する2つのMS2 RNAアプタマーと融合しており、さらにピューロマイシン耐性遺伝子が付随している。これら3つのプラスミドは、システム構成要素すべてが均等に発現するよう、質量比1:1:1で導入される。

標的遺伝子座に集合すると、SAM複合体はCSH1転写開始点の上流約200 bpの領域に結合し、そこでVP64、p65、およびHSF1が協調して転写装置を動員し、内因性CSH1の発現上昇を促進する。ヌクレアーゼ活性を持つCas9とは異なり、 dCas9は二本鎖切断を導入したりゲノム配列を改変したりしないため、天然のCSH1遺伝子座が保持され、内因性遺伝子座におけるCSH1依存性の転写応答の研究が可能となります。これにより、機能解析、標的遺伝子の同定、およびCSH1発現が沈黙または低下した腫瘍細胞におけるCSH1経路の回復のモデル化を行う上で、貴重なツールとなります。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。