Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) CRY1: sc-400946-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) CRY1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide CRY1 Double Nickase (h) et le plasmide CRY1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CRY1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: CRY1 Antibody (H-12): sc-393466
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) CRY1 | sc-400946-NIC | 20 µg | $410.00 |
CRY1 (cryptochrome, régulateur circadien 1) code un composant essentiel de l’horloge circadienne des mammifères, qui agit au sein de la boucle de rétrocontrôle transcriptionnelle–traductionnelle en réprimant l’expression génique induite par le complexe CLOCK–BMAL1. En s’intégrant aux protéines PER et aux complexes régulateurs associés, CRY1 contribue à coordonner le contrôle rythmique du métabolisme, du timing du cycle cellulaire, des réponses aux dommages de l’ADN et de la signalisation endocrinienne dans les différents tissus. Des altérations de l’activité ou de l’expression de CRY1 ont été associées à une perturbation des rythmes circadiens et à des effets en aval sur la régulation veille–sommeil et l’homéostasie métabolique ; CRY1 est ainsi fréquemment étudié dans le contexte des réseaux transcriptionnels contrôlés par l’horloge. Ces propriétés font de CRY1 un nœud pertinent pour étudier comment la régulation temporelle façonne la physiologie cellulaire et l’adaptation au stress.
CRY1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CRY1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CRY1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CRY1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CRY1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.