COPG Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404407

Visão geral

COPG1 codifica a subunidade gama do complexo proteico coatômero I (COPI), um complexo de revestimento citosólico que medeia a brotação de vesículas e a seleção de carga no transporte retrógrado do complexo de Golgi para o retículo endoplasmático e entre cisternas do Golgi. O COPG participa da montagem do revestimento junto com outras subunidades do COPI para regular o tráfego de membranas, a organização do Golgi e a recuperação de proteínas residentes do RE por meio de sinais de triagem, sustentando assim a maturação proteica e a homeostase da via secretória. A disrupção do tráfego dependente de COPI pode perturbar respostas ao estresse do RE, a glicosilação e a proteostase, ligando a função de COPG1 a vias relevantes para crescimento celular, diferenciação e adaptação ao estresse. Programas secretórios e de tráfego alterados são frequentemente explorados por estados patológicos proliferativos e relacionados ao sistema imune, tornando o COPG1 um ponto útil para estudos mecanísticos de transporte de membranas e dinâmica de organelas.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO COPG (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene COPG1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do COPG1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do COPG1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína COPG.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de COPG1 para a investigação da sinalização de COPG, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) COPG1 críticos para a função COPG
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos COPG1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo COPG Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo COPG Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus COPG1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo COPG Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR COPG (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia COPG1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo COPG1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.