Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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COL5A1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401579-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- COL5A1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase COL5A1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase COL5A1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para COL5A1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:COL5A1 Anticorpo (C-5): sc-166155
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
COL5A1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401579-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
COL5A1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401579-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
COL5A1 codifica a cadeia alfa 1 do colágeno tipo V, um colágeno fibrilar quantitativamente minoritário, porém funcionalmente crítico, que regula a fibrilogênese do colágeno e controla o diâmetro e a organização das fibras de colágeno tipo I/V na matriz extracelular. Por meio de seu papel na montagem da matriz, COL5A1 influencia a sinalização célula–matriz, a resistência à tração dos tecidos e processos de remodelamento que se conectam à adesão mediada por integrinas e a vias que governam o comportamento de fibroblastos. Alterações na função ou na expressão de COL5A1 estão associadas a doenças hereditárias do tecido conjuntivo, incluindo a síndrome de Ehlers–Danlos clássica, e são frequentemente estudadas em contextos de mecânica da pele e de tendões, integridade vascular e desregulação da matriz. Como determinante estrutural da MEC, também é relevante para investigar como a arquitetura do colágeno modula o desenvolvimento, o reparo de feridas e as contribuições do estroma para fenótipos de doença.
COL5A1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus COL5A1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de COL5A1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função COL5A1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com COL5A1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.