COL1A2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400598-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- COL1A2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase COL1A2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase COL1A2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para COL1A2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Pro-COL1A2 Anticorpo (D-6): sc-166572
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
COL1A2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400598-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
COL1A2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400598-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
COL1A2 codifica a cadeia pro-α2 do colagénio tipo I, um colagénio fibrilar principal que se monta em heterotrímeros com o COL1A1 para formar o suporte estrutural da matriz extracelular no osso, tendão, derme e outros tecidos conjuntivos. A biossíntese e a maturação do colagénio tipo I envolvem o processamento do procolagénio, a formação da hélice tripla, a secreção e a fibrilogénese extracelular, em coordenação com vias de adesão mediada por integrinas, mecanotransdução e remodelação da matriz. Alterações na expressão ou na sequência de COL1A2 podem perturbar a organização das fibras de colagénio e a rigidez da matriz, comprometendo a integridade dos tecidos e influenciando a sinalização célula–matriz em contextos musculoesqueléticos e fibróticos. Como componente central da MEC, COL1A2 é frequentemente estudado na diferenciação de osteoblastos, na reparação de feridas, na biologia do estroma e na regulação, dependente da matriz, da disponibilidade de fatores de crescimento.
COL1A2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus COL1A2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de COL1A2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função COL1A2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com COL1A2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.