Plasmide Double Nickase (h) COL17A1: sc-402747-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) COL17A1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide COL17A1 Double Nickase (h) et le plasmide COL17A1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant COL17A1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) COL17A1 | sc-402747-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) COL17A1 | sc-402747-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
COL17A1 code pour la chaîne alpha 1 du collagène de type XVII, un composant transmembranaire des hémidesmosomes qui ancre les kératinocytes basaux à la membrane basale via des interactions avec la laminine‑332 et les intégrines. En stabilisant l’adhérence dermo‑épidermique et en organisant les contacts avec la matrice extracellulaire, COL17A1 contribue à l’intégrité de l’épiderme, à la résistance mécanique et à l’homéostasie épithéliale. Des altérations de l’expression ou de la fonction de COL17A1 sont associées à des phénotypes de décollement cutané et à un ciblage auto-immun au niveau de la jonction dermo‑épidermique ; le gène est également étudié dans le contexte du remodelage épithélial et de l’invasion tumorale. Ces propriétés font de COL17A1 une cible pertinente pour étudier la signalisation d’adhérence, les interfaces matrice–cellule et la stabilité des jonctions dans les systèmes épithéliaux humains.
COL17A1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus COL17A1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de COL17A1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de COL17A1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de COL17A1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.