Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
CLN2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405204
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CLN2 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico CLN2, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CLN2 Anticorpo (G-3): sc-393961
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CLN2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-405204 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
TPP1 codifica a tripeptidil peptidase 1 (CLN2), uma protease serina lisossomal que remove tripeptídeos das extremidades N-terminais de polipeptídeos durante a renovação proteica intralisossomal. A atividade de CLN2 sustenta processos catabólicos dependentes de lisossomos que se interligam com o fluxo autofagia–lisossomo, o tráfego endolisossomal e a manutenção da proteostase em tipos celulares metabolicamente ativos. A perda de função de TPP1 perturba a proteólise lisossomal e contribui para a vulnerabilidade neuronal, sendo variantes patogênicas associadas à lipofuscinose ceróide neuronal relacionada a CLN2 e a uma patologia mais ampla de doenças de armazenamento lisossomal. Consequentemente, TPP1/CLN2 é amplamente estudado em modelos de função lisossomal, respostas ao estresse e mecanismos que acoplam a degradação prejudicada à disfunção celular.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO CLN2 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene TPP1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do TPP1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do TPP1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína CLN2.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de TPP1 para a investigação da sinalização de CLN2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) TPP1 críticos para a função CLN2
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos TPP1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo CLN2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo CLN2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus TPP1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo CLN2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR CLN2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia TPP1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo TPP1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.