CLEC-2B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-425297

Visão geral

Clec1b codifica, no camundongo, o receptor de lectina do tipo C CLEC-2B, uma proteína de membrana do tipo II implicada na sinalização dependente de ligante na superfície celular. Como membro da família de receptores semelhantes a lectinas do tipo C, o CLEC-2B contribui para a regulação da comunicação celular relacionada aos sistemas imune e vascular ao modular a ativação mediada por receptores e as cascatas de fosforilação a jusante. Ligações funcionais com redes de sinalização associadas a plaquetas e microambientes inflamatórios tornam o Clec1b relevante para estudos de hemostasia, interações leucócito–endotélio e remodelamento tecidual. A desregulação da sinalização de receptores de lectina é frequentemente investigada no contexto de inflamação associada à trombose e patologia mediada pelo sistema imune, usando modelos mecanísticos em camundongos.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO CLEC-2B (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Clec1b em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Clec1b, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Clec1b na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína CLEC-2B.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Clec1b para a investigação da sinalização de CLEC-2B, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Clec1b críticos para a função CLEC-2B
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Clec1b para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo CLEC-2B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo CLEC-2B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Clec1b. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo CLEC-2B Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR CLEC-2B (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Clec1b para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Clec1b definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.