Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Cks1 Double Nickaseプラスミド (h): sc-403019-NIC
- 対象生物種: human
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- Cks1 Double Nickaseプラスミド (h)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- Cks1ダブルニカースプラスミド（h）およびCks1ダブルニカースプラスミド（h2）は、CKS1Bを標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
Cks1 Double Nickaseプラスミド (h) | sc-403019-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Cks1 Double Nickaseプラスミド (h2) | sc-403019-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ヒトのCKS1Bは、保存性の高いサイクリン依存性キナーゼ（CDK）制御サブユニットであるCks1をコードしており、CDK複合体をSCF^SKP2 E3ユビキチンリガーゼ活性へと結び付け、適切なタイミングでの細胞周期移行を促進します。Cks1は、p27^Kip1などのCDK阻害因子のユビキチン化と分解を促すことで、増殖シグナル下におけるG1/S移行、DNA複製の実行能、ならびにチェックポイントからの回復の協調に寄与します。CKS1B発現の破綻は、プロテオスタシスの変化や異常な増殖プログラムとしばしば関連しており、がん性の細胞周期制御やゲノム安定性の研究において重要な対象となります。そのためCks1は、CDKシグナル、ユビキチン依存的分解、そして複製ストレス応答を結び付ける経路の解析で頻繁に取り上げられます。
Cks1 ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における CKS1B 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、CKS1B内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、CKS1Bの機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、CKS1Bが破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。