CHTOP Lentiviral Activation Particles (h): sc-411874-LAC

CHTOP (chromatin target of PRMT1) ist ein nukleäres RNA-bindendes Protein, das die transkriptionsgekoppelte mRNA-Prozessierung koordiniert, indem es chromatinassoziierte Ereignisse mit dem Spleißen der Prä-mRNA, der 3′-Endbildung und dem mRNA-Export verknüpft. Es wirkt innerhalb der TREX/THO-mRNP-Exportmaschinerie und ist an epigenetischer sowie posttranskriptioneller Regulation beteiligt, einschließlich argininmethylierungsabhängiger Interaktionen, die die R‑Loop-Homöostase und die Genomstabilität beeinflussen. Über diese Funktionen trägt CHTOP dazu bei, Genexpressionsprogramme zu formen, die die Zellzyklusprogression, DNA-Schadensantworten und Differenzierung steuern. Eine dysregulierte Expression oder Funktion von CHTOP wurde mit veränderten Signaturen des RNA-Stoffwechsels in Verbindung gebracht, wie sie bei Krebs und anderen proliferativen oder stressadaptiven Zuständen beobachtet werden, was seine Relevanz für mechanistische Studien zu krankheitsassoziierten Phänotypen unterstreicht, die durch Störungen der RNA-Prozessierung getrieben sind.

CHTOP Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente CHTOP-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

CHTOP Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der CHTOP-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen CHTOP-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen CHTOP-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.