Chk2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400438-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Chk2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Chk2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Chk2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CHEK2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Chk2 Anticorpo (A-11): sc-17747
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Chk2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400438-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Chk2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400438-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CHEK2 codifica a quinase de checkpoint 2 (Chk2), uma quinase de serina/treonina ativada a jusante de ATM em resposta a quebras de dupla fita no DNA. Após a fosforilação, a Chk2 propaga a sinalização de dano ao DNA para regular checkpoints do ciclo celular, a coordenação do reparo do DNA e a apoptose, por meio de substratos como p53, fosfatases CDC25 e BRCA1. Essa via integra sinais de estresse genômico ao controle da replicação para preservar a integridade do genoma durante a fase S e a mitose. A sinalização CHEK2/Chk2 desregulada e variantes herdadas ou adquiridas têm sido associadas a fenótipos de instabilidade genômica e à suscetibilidade ao câncer, tornando-a um nó amplamente utilizado para estudar a circuitaria da resposta ao dano no DNA.
Chk2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CHEK2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CHEK2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CHEK2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CHEK2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.