CHD1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404299-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CHD1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase CHD1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase CHD1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CHD1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CHD1 Anticorpo (C-8): sc-271626
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CHD1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404299-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CHD1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404299-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CHD1 (proteína 1 de ligação ao DNA da helicase com cromodomínio) é um remodelador de cromatina dependente de ATP que reconhece marcas de histonas metiladas por meio de seus cromodomínios e reposiciona nucleossomos para moldar a acessibilidade da cromatina. Ele dá suporte à regulação transcricional, ao alongamento da RNA polimerase II e à manutenção de cromatina aberta em promotores ativos e corpos gênicos, ligando-se a processos como replicação do DNA, resposta a danos no DNA e estabilidade do genoma. A função de CHD1 se cruza com vias de organização da cromatina e de controle epigenético que influenciam a identidade celular e programas de diferenciação. Alterações na atividade ou no status genômico de CHD1 têm sido associadas à desregulação transcricional e a fenótipos de instabilidade genômica relevantes para a biologia do câncer e mecanismos relacionados de doenças impulsionadas por alterações na cromatina.
CHD1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CHD1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CHD1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CHD1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CHD1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.