CEP164 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-403550

概要

CEP164（centrosomal protein 164）は、母中心小体の遠位付属体を構成する因子で、一次繊毛の形成開始および繊毛小胞の基底小体へのドッキングに必須です。遠位付属体の組み立てのための足場（スキャフォールド）として機能し、繊毛形成因子のリクルートを支えることで、中心体の成熟を繊毛形成や細胞周期制御と結び付けます。中心体―繊毛軸の制御における役割を通じて、CEP164は、Hedgehog 依存的過程を含む一次繊毛が統括するシグナル伝達経路にも影響します。CEP164の発現異常や変異は、繊毛機能障害に起因する発生異常など、繊毛症の表現型と関連しており、特にネフロン癆（nephronophthisis）関連疾患で顕著です。

CEP164 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるCEP164遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、CEP164内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、CEP164のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、CEP164タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、CEP164シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、CEP164欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• CEP164の機能に不可欠なCEP164エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、CEP164ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• CEP164 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびCEP164 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、CEP164遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  CEP164 HDRプラスミド（h）および CEP164 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCEP164ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCEP164標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。