Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Centaurin α1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407463
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Centaurin α1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Centaurin α1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Centaurin α1 Anticorpo (G-4): sc-390498
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Centaurin α1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-407463 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
ADAP1 codifica a centaurina α1, uma proteína ativadora de GTPase de Arf com um domínio de homologia a pleckstrina que conecta a sinalização por fosfoinositídeos ao tráfego de membranas e ao remodelamento do citoesqueleto de actina. Ao modular eventos de endocitose e de transporte vesicular dependentes de Arf, a centaurina α1 ajuda a coordenar a reciclagem de receptores e a propagação de sinais a jusante de lipídios gerados pela PI3K. A proteína tem sido associada à regulação da migração celular e da dinâmica de adesão, processos centrais para a organização dos tecidos e a responsividade celular. Alterações na atividade de ADAP1 têm sido investigadas em contextos em que o tráfego desregulado e o controle do citoesqueleto contribuem para fenótipos associados a doenças, incluindo comportamento invasivo e sinalização aberrante.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Centaurin α1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene ADAP1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do ADAP1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do ADAP1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Centaurin α1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de ADAP1 para a investigação da sinalização de Centaurin α1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) ADAP1 críticos para a função Centaurin α1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos ADAP1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Centaurin α1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Centaurin α1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus ADAP1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Centaurin α1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Centaurin α1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia ADAP1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo ADAP1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.