CEACAM1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-417666

概要

CEACAM1（carcinoembryonic antigen-related cell adhesion molecule 1）は免疫グロブリンスーパーファミリーに属する細胞表面糖タンパク質で、上皮および内皮の界面において同種（ホモフィリック）および異種（ヘテロフィリック）の接着を仲介します。細胞質側のITIMモチーフを介して、CEACAM1はホスファターゼ依存性シグナル伝達を調節し、MAPKおよびPI3K/AKT経路の出力、細胞骨格の構築、ならびに細胞間接合の完全性に影響を与えます。また、白血球上では免疫調節受容体として機能し、炎症性微小環境における活性化の閾値やサイトカイン応答を規定します。CEACAM1の発現異常やアイソフォームバランスの破綻は、バリア機能の変化、免疫回避、血管新生に伴うリモデリング、さらに複数の固形腫瘍や炎症性疾患における進展表現型と関連していることが示されています。

CEACAM1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるCEACAM1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、CEACAM1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、CEACAM1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、CEACAM1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、CEACAM1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、CEACAM1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• CEACAM1の機能に不可欠なCEACAM1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、CEACAM1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• CEACAM1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびCEACAM1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、CEACAM1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  CEACAM1 HDRプラスミド（h）および CEACAM1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCEACAM1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCEACAM1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。