Plasmide CRISPR/Cas9 KO Cdx1 (h): sc-402522
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Cdx1 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique Cdx1, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Cdx1 Antibody (D-4): sc-515146
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Cdx1 (h) | sc-402522 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
CDX1 code le facteur de transcription à homéoboîte de type caudal Cdx1, un régulateur de la liaison à l’ADN dépendante de la séquence, qui contribue à la mise en place de l’axe antéro-postérieur et soutient la différenciation de l’épithélium intestinal. Cdx1 agit au sein de programmes transcriptionnels pilotés par les homéoboîtes et s’articule avec des voies telles que la signalisation Wnt/β-caténine, qui façonnent le développement intestinal, les décisions de destinée cellulaire et l’identité régionale. Une expression altérée de CDX1 a été rapportée dans des contextes de maladies gastro-intestinales, notamment en biologie tumorale colorectale, où une différenciation dérégulée et des signaux prolifératifs anormaux sont des caractéristiques fréquentes. En tant que facteur de transcription associé à une lignée, CDX1 est souvent utilisé pour étudier les mécanismes de maturation épithéliale, des programmes géniques de type métaplasique et le remodelage des réseaux transcriptionnels.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Cdx1 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène CDX1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du CDX1, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert CDX1 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Cdx1.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en CDX1 pour l'étude de la signalisation de Cdx1, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de CDX1 essentiels à la fonction de Cdx1
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de CDX1 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le Cdx1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le Cdx1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus CDX1. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le Cdx1 plasmide HDR (h) et le Cdx1 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie CDX1 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles CDX1 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.