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CDw75/ST6GAL1双切口酶质粒(h) | sc-402881-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CDw75/ST6GAL1双切口酶质粒(h2) | sc-402881-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ST6GAL1(CDw75)编码β-半乳糖苷α-2,6-唾液酸转移酶1,这是一种定位于高尔基体的酶,催化膜蛋白和分泌型糖蛋白上N-连接糖链末端的α2,6-唾液酸化修饰。该修饰会影响糖蛋白折叠、受体稳定性以及配体识别,并通过改变依赖糖链的结合事件,进而影响细胞-细胞相互作用、免疫调控和信号转导。ST6GAL1活性参与调控B细胞与上皮细胞表面糖组(glycome),并影响黏附、迁移和凋亡等过程。ST6GAL1表达失调及α2,6-唾液酸化模式异常与肿瘤细胞行为改变、炎症以及感染易感性相关,因此成为糖生物学与疾病机制研究中的关键节点。
CDw75/ST6GAL1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 ST6GAL1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对ST6GAL1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏ST6GAL1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了ST6GAL1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。