Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO CDKN2C/p18 INK4c (h): sc-401214
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- CDKN2C/p18 INK4c Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique CDKN2C/p18 INK4c, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: CDKN2C/p18 INK4c Antibody (118.2): sc-9965
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO CDKN2C/p18 INK4c (h) | sc-401214 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
CDKN2C code pour p18^INK4c, un membre de la famille INK4 des inhibiteurs de kinases dépendantes des cyclines, qui se lie à CDK4 et CDK6 afin de limiter la phosphorylation de RB induite par la cycline D et d’assurer le point de contrôle G1/S. En restreignant les programmes transcriptionnels dépendants d’E2F, CDKN2C contribue au contrôle de la progression du cycle cellulaire, de l’engagement de lignée et de la quiescence cellulaire dans de nombreux tissus. Les altérations de la fonction de CDKN2C sont fréquemment étudiées dans le contexte d’une dérégulation de la signalisation CDK4/6–RB, de l’instabilité génomique et de phénotypes prolifératifs pertinents pour la biologie du cancer. CDKN2C est également utilisé comme nœud mécanistique pour relier les signaux mitogènes à l’intégrité des points de contrôle dans des modèles de stress oncogénique.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO CDKN2C/p18 INK4c (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène CDKN2C dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du CDKN2C, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert CDKN2C à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine CDKN2C/p18 INK4c.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en CDKN2C pour l'étude de la signalisation de CDKN2C/p18 INK4c, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de CDKN2C essentiels à la fonction de CDKN2C/p18 INK4c
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de CDKN2C pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le CDKN2C/p18 INK4c plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le CDKN2C/p18 INK4c plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus CDKN2C. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le CDKN2C/p18 INK4c plasmide HDR (h) et le CDKN2C/p18 INK4c (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie CDKN2C pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles CDKN2C définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.