CDKN2B/p15 INK4B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419611
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CDKN2B/p15 INK4B O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico CDKN2B/p15 INK4B, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:PCLAF Anticorpo (G-11): sc-390515
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CDKN2B/p15 INK4B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419611 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene Cdkn2b de camundongo codifica CDKN2B/p15 INK4B, um inibidor de quinases dependentes de ciclina que limita a atividade de CDK4/6 para manter o controle do ponto de checagem G1/S dependente de RB. Como um efetor-chave a jusante de sinais antiproliferativos, como a via de TGF-β, p15 ajuda a coordenar a parada do ciclo celular, programas de diferenciação de linhagem e respostas ao estresse oncogênico. A disrupção ou o silenciamento epigenético de Cdkn2b é frequentemente associado à proliferação desregulada e é estudado no contexto de redes de supressores tumorais e de modelos de transformação hematopoética e epitelial. A função de Cdkn2b é comumente investigada em conjunto com o lócus CDKN2A/B, o eixo CDK4/6–RB–E2F e vias associadas à senescência.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO CDKN2B/p15 INK4B (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Cdkn2b em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Cdkn2b, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Cdkn2b na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína CDKN2B/p15 INK4B.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Cdkn2b para a investigação da sinalização de CDKN2B/p15 INK4B, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Cdkn2b críticos para a função CDKN2B/p15 INK4B
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Cdkn2b para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo CDKN2B/p15 INK4B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo CDKN2B/p15 INK4B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Cdkn2b. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo CDKN2B/p15 INK4B Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR CDKN2B/p15 INK4B (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Cdkn2b para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Cdkn2b definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.